大蒜素和鹽酸小檗堿對革蘭陰性菌的聯(lián)合抗菌作用研究
Study on combined inhibitory effect of allicin and berberine hydrochloride on Gram-negative bacteria


1.5萬字 37頁 原創(chuàng)作品，已通過查重系統(tǒng)


摘 要：慢性疾病一直著困擾很多患者，而西藥的廣泛使用會導(dǎo)致超級耐藥菌的產(chǎn)生，因此本課題組致力于找到合適的中藥。我國南宋著名醫(yī)學(xué)家許叔微在其所著《普濟(jì)本事方》中有提出“蒜連圓”古方，針對此類疾病提出大蒜和黃連的聯(lián)合使用。為了進(jìn)一步探討研究鹽酸小檗堿與大蒜素對部分革蘭陰性菌（此次主要涉及大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、變形桿菌、綠膿桿菌）的聯(lián)合抑制作用。本課題主要從以下方面研究：
（1）確定菌懸液標(biāo)準(zhǔn)曲線，以配制一定濃度的菌懸液。通過涂平板得到平均菌落數(shù)，計算菌落形成單位（CFUColony-Forming Units），繪制菌落形成單位-吸光度曲線，在625nm波長下測定比濁度為0.5麥?zhǔn)蠒r大腸桿菌的紫外吸光度A=0.1152、肺炎克雷伯菌的紫外吸光度A=0.2595、變形桿菌的紫外吸光度A=0.0595，綠膿桿菌的紫外吸光度A=0.2884。
（2）根據(jù)第一步中的結(jié)果配制好菌懸液，在96孔板上采用二倍微量稀釋法測量大蒜素和鹽酸小檗堿對四種革蘭氏陰性菌的最小抑菌濃度（MIC，Minimum Inhibitory Concentration）。最終測定結(jié)果為大腸桿菌：MIC（大蒜素）=1.5625mg/ml、MIC（鹽酸小檗堿）=0.15625mg/ml；肺炎克雷伯菌：MIC（大蒜素）=50mg/ml、MIC（鹽酸小檗堿）=0.3125mg/ml；變形桿菌：MIC（大蒜素）50mg/ml、MIC（鹽酸小檗堿）=0.15625mg/ml；綠膿桿菌：MIC（大蒜素）=6.25mg/ml、MIC（鹽酸小檗堿）=0.15625mg/ml。
（3）通過棋盤稀釋法探究大蒜素和鹽酸小檗堿對于四種革蘭氏陰性菌的聯(lián)合用藥效果。以部分抑菌濃度（fractional inhibitory concentraction）FIC為主要參數(shù)，當(dāng)FIC≤0.5時，兩藥的相互作用為協(xié)同作用（Synsynergism），且FIC指數(shù)越小，協(xié)同作用越強；當(dāng)0.5＜FIC＜1時，兩藥的相互作用確定為相加作用（Addaddition）；當(dāng)1＜FIC＜4時，兩藥的相互作用確定為無關(guān)作用（Indiffindifference）；當(dāng)FIC＞4時，兩藥的相互作用確定為拮抗作用（Antagantagonism）。最終測定結(jié)果為大腸桿菌：FIC指數(shù)=1/4+1/4=1/2，兩種藥物聯(lián)合為協(xié)同作用；肺炎克雷伯菌：FIC指數(shù)=1/2+1/4=3/4，兩種藥物聯(lián)合為相加作用；變形桿菌：FIC指數(shù)=1/2+1/2=1，兩種藥物聯(lián)合為相加作用；綠膿桿菌：FIC指數(shù)=1/4+1/4=1/2，兩種藥物聯(lián)合為協(xié)同作用。


關(guān)鍵詞：革蘭氏陰性菌；大蒜素；鹽酸小檗堿；聯(lián)合用藥