一株源于厭氧除磷反應(yīng)器ＮＬ菌的鑒定及活性研究

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摘 要
采用濃縮池污泥為種泥，在厭氧混合連續(xù)流反應(yīng)裝置內(nèi)進(jìn)行厭氧除磷產(chǎn)生氣態(tài)磷化氫功能菌的富集。利用傳統(tǒng)和現(xiàn)代微生物的分離、鑒定相結(jié)合手段，從細(xì)菌形態(tài)、生理生化指標(biāo)、16S rDNA三方面確定了功能菌株的分類地位并使用厭氧反應(yīng)瓶對其進(jìn)行了活性研究。結(jié)果表明，NL菌確定為一株異養(yǎng)型厭氧除磷菌，與Pseudomonas aeruginosa銅綠假單胞菌的同源性高達(dá)98.2%。該菌的良好碳源和氮源是葡萄糖、乙酸鈉和蛋白胨、氯化銨、亞硝酸鈉復(fù)合成份，纖維素不適合作為該菌的碳源。反應(yīng)最佳初始pH值為6.5～7的范圍，最適宜的溫度為30～35℃,當(dāng)溫度為4℃時(shí)或者高于35℃時(shí)微生物活性下降。培養(yǎng)液中添加有機(jī)磷及鈣離子對磷的去除有顯著的作用，投加還原劑硫化物對厭氧生物除磷沒有顯著的作用。
關(guān)鍵詞：厭氧除磷 厭氧除磷菌 磷酸鹽還原 磷化氫




目 錄
1 前言 1
2 材料與方法 2
2.1 使用儀器及設(shè)備 2
2.2 厭氧培養(yǎng)反應(yīng)裝置 2
2.2.1 厭氧除磷功能菌培養(yǎng)的混合連續(xù)流反應(yīng)裝置 3
2.2.2 厭氧除磷功能菌株的活性試驗(yàn)的反應(yīng)瓶 4
2.3 供試材料 4
2.3.1 供試種泥 4
2.3.2 培養(yǎng)基和基礎(chǔ)培養(yǎng)液 4
2.3.2.1 篩選功能菌株的基礎(chǔ)培養(yǎng)液 4
2.3.2.2 功能菌株分離與純化的培養(yǎng)基 4
2.4 試驗(yàn)方法與步驟 4
2.4.1 厭氧除磷功能菌的培養(yǎng) 4
2.4.2 厭氧除磷功能菌株的分離、純化與保存 5
2.4.3 顯微形態(tài)觀察 5
2.4.4 厭氧除磷功能菌株的生理生化指標(biāo)試驗(yàn) 5
2.4.5 DNA提取、PCR擴(kuò)增、基因序列比對及進(jìn)化樹構(gòu)建 5
2.4.6 厭氧除磷功能菌株的活性試驗(yàn) 5
2.4.6.1 活性試驗(yàn)的培養(yǎng)液 6
2.4.6.2 活性試驗(yàn)的步驟 6
2.5 指標(biāo)分析方法 6
2.5.1 總磷、磷酸鹽采用鉬酸銨分光光度法測定 6
2.5.2 吸收液磷化氫測定 7
3 結(jié)果與討論 7
3.1 NL菌株的形態(tài)觀察及生理生化指標(biāo) 7
3.2 NL菌株的16Sr DNA基因的序列、系統(tǒng)發(fā)育分析 8
3.3 NL菌株的活性試驗(yàn) 10
3.3.1 營養(yǎng)條件對總磷去除及PH3生成的影響 10
3.3.1.1 不同碳源對總磷去除及PH3生成的影響 10
3.3.1.2 不同氮源對總磷去除及PH3生成的影響 11
3.3.1.3 投加有機(jī)磷對總磷去除及PH3生成的影響 12
3.3.1.4 投加鈣離子對總磷去除及PH3生成的影響 13
3.3.1.5 探討營養(yǎng)條件對NL菌活性的影響 14
3.3.2 環(huán)境條件總磷去除及PH3生成的變化過程 16
3.3.2.1 不同初始的pH值總磷去除及PH3生成的變化過程 16
3.3.2.2 不同溫度總磷去除及PH3生成的變化過程 17
3.3.2.3 投加還原劑（硫化鈉）的活性試驗(yàn) 18
3.3.2.4 探討環(huán)境條件對NL菌株總磷去除及PH3生成的影響 19
4 結(jié)論 20
參考文獻(xiàn) 21
英文摘要 23
附錄 24
致謝 26
畢業(yè)論文成績評定表



參 考 文 獻(xiàn)
[1] 李紅山, 黎松強(qiáng). 赤潮形成與富營養(yǎng)化及生化防治機(jī)理—污水深度處理與脫氮除磷 [J]. 海洋技術(shù), 2002, 21(2): 69-72.
[2] 鄭興燦, 李亞新. 污水除磷脫氮技術(shù) [M]. 北京: 中國建筑工業(yè)出社, 1998. 192-250.
[3] 徐亞同. 廢水中氮磷的處理 [M]. 上海: 華東師范大學(xué)出版社, 1996. 114-170.
[4] Devai l,Feldolfi L,Wittner I,et al. Detection of phosphine:new aspects of the phosphorus cycle in the hydrosphere [J]. Nature, l988, 333: 343-345.
[5] Gassmann G, Glindemann D. Phosphane（PH3) in the Biosphere [J]. Angewandte Chemie (International Edition in English),1993, 32(5): 761-763.
[6] Gassmann G,Schorn F.Phosphine from Harbor Surface Sediments [J]. Naturewissenschaften, 1993, 80(2): 78-80.
[7] lstvan D, Lajos F, Ilona W, et a1.Detection of phosphine: new aspects of the phosphorus cycle in the hydrosphere [J]. Nature,1988, 333(26): 343—345.
[8] 王強(qiáng), 耿金菊, 金紅梅, 等.太湖沉積物中微生物和磷化氫的時(shí)空分布及關(guān)系[J]. 中國環(huán)境科學(xué), 2006,26(3):350-354.
[9] 曹海峰, 劉季昂, 莊亞輝. 環(huán)境中磷化氫的源及厭氧條件下前體物類型的研究* [J]. 中國科學(xué)B輯, 2000, 30(1): 63-68.
[10] Tsubota G.Phosphate reduction in the paddy field [J]. Soil and Plant Food, 1959, 5(1): 10-15.
[11] Jenkins R O, Morris T-A, Craig P J.et al. Phosphine generation by mixed and monoseptic-cultures of anaerobic bacteria [J]. The Science of the Total Environment. 2000, 250: 73-81.