11頁8000余字
摘 要………………………………………………………………………………………2
前 言………………………………………………………………………………………2
一、材料、試劑和儀器 ………………………………………………………………3
1、 材料………………………………………………………………3
2、試劑………………………………………………………………3
3、儀器………………………………………………………………4
二、操作方法………………………………………………………………4
1、 葉綠體的制備 ………………………………………………………………4
1.1 葉綠體的分離提取…………………………………………………4
1.2 提純………………………………………………………………4
1.2.1 制備蔗糖梯度……………………………………………………4
1.2.2 葉綠體的純化……………………………………………………4
1.3 鏡檢……………………………………………………………4
2、葉綠體DNA的提取……………………………………………………………5
2.1 DNA的提取………………………………………………………………5
2.2 沉淀DNA………………………………………………………………5
3、所得DNA檢驗(yàn)分析……………………………………………………………5
3.1 核酸濃度測定…………………………………………………………5
3.2瓊脂糖凝膠電泳…………………………………………………………5
三、結(jié)果…………………………………………………………6
1、 圖片………………………………………………………………6
2、 外分光光度檢測結(jié)果……………………………………………………7
四、討論和分析………………………………………………………………7
參考文獻(xiàn)……………………………………………………………9






[摘 要] 采用菠菜綠葉為材料，通過差速離心分離、密度梯度離心分離純化出葉綠體。顯微鏡下觀察所得葉綠體純度、形態(tài)及結(jié)構(gòu)，得到橢圓、球形的葉綠體。樣品用SDS、蛋白酶K、核酸酶處理后，用苯酚/氯仿及氯仿/異戊醇抽提處理提取。純化提出的ctDNA用紫外分光光度計(jì)檢測提取濃度，1%瓊脂糖電泳得到清晰而整齊的條帶。

[關(guān)鍵詞] 葉綠體 差速離心 密度梯度離心 ctDNA
Distill the DNA of the Plant Subcellular Chloroplast
Abstract： Distill the chloroplast from thespinachleaves by the differential centrifugation and pure them by the density gradient centrifugation. Examine the concentration and shape of these chloroplast from microscope.We saw round and ellipse chloroplast. Then treat the chloroplast with SDS, Dnase and proteinase. After that , we can extract the ctDNA (chloroplast DNA) with phenol/chloroform and chloroform/isoamyl alcohol. Examine this extractive with the 1% agrose electrophoresis and the quantity of the ctDNa with spectrophotometer, and the strip of it is quite regular and clear.
Key Words: chloroplast differential centrifugation density gradient centrifugation ctDNa

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