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摘要：農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆轉(zhuǎn)化體系主要包括無(wú)菌苗制備、菌株培養(yǎng)、農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化、不定芽誘導(dǎo)、芽伸長(zhǎng)、生根及移栽等6個(gè)步驟。為了建立高效的農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化體系，本實(shí)驗(yàn)以熱脅迫因子8（HSP8）作為轉(zhuǎn)化的目的基因，從受體材料基因型、誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基激素配比、外植體切割部位、侵染時(shí)間等四個(gè)方面進(jìn)行研究，初步確立了該轉(zhuǎn)化體系以大豆品種“早熟18”為受體材料，以MS + 1.30mg/L BA + 0.25mg/L IBA + 0.6%瓊脂+3%蔗糖（PH5 .6）為誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基，切割部位為上胚軸的基部和子葉近胚軸的分生組織膨大處，切片厚度為2mm，農(nóng)桿菌侵染時(shí)間為15-20分鐘。

關(guān)鍵詞：農(nóng)桿菌介導(dǎo)；轉(zhuǎn)化體系；大豆；子葉節(jié)

Establishment of an efficient transforming system mediated
by agrobacterium tumefacien in soybean
Abstract The transfer system by Agrobacterium-mediated for soybean include six steps:preparation of sterilize plant,culture of bacterial strain,transformation by agrobacterium-mediated,shoot induction,shoot elongation,root induction and transplanting.Effect of the type of receptor,age of calli,duration of infection and induction on transformation rate were studied,and a highly efficient Agrobacterium-mediated gene transfor system has been established for soybean.

Key words Agrobacterium-mediated;Transformation system;Soybean;Cotyledonary nodes

前 言
大豆（Glycine max L.）是重要的農(nóng)作物和經(jīng)濟(jì)作物，又是工業(yè)原料和牲畜家禽的重要飼料。常規(guī)育種技術(shù)具有很大的局限性，存在育種年限長(zhǎng)、難以打破性狀連鎖、多基因重組率低、抗源不足、遠(yuǎn)緣雜交困難等弊端。
近年來(lái)，人們對(duì)大豆的組織培養(yǎng)再生和轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行大量的研究，但到目前為止，大豆還是公認(rèn)的難轉(zhuǎn)化的植物之一，這是因?yàn)榇蠖菇M織培養(yǎng)再生困難，可重復(fù)性差，轉(zhuǎn)化頻率在基因型之間差異較大，遺傳轉(zhuǎn)化體系還不完善等原因，使利用基因工程手段對(duì)大豆進(jìn)行遺傳改良受到了限制。因此，只有建立良好的轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)，才有可能使轉(zhuǎn)基因技術(shù)在大豆的性狀改良、新品種的培育中發(fā)揮作用。
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)根癌農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒介導(dǎo)熱脅迫因子8（HSP 8）轉(zhuǎn)化體系的初步研究，探尋影響大豆再生的誘導(dǎo)因素，改善植株的再生條件，來(lái)克服大豆再生困難，重復(fù)性差等問(wèn)題。并在此基礎(chǔ)上優(yōu)化農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)大豆進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的影響因素，建立一個(gè)適于大豆遺傳轉(zhuǎn)化的高效受體，為大豆基因轉(zhuǎn)移技術(shù)提供依據(jù)。。。。。。。。。。。
參考文獻(xiàn)

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