應(yīng)用微衛(wèi)星標(biāo)記法（SSR）鑒定水稻雜種后代秈粳特性的研究

本文共22頁 8740字

摘要

水稻是我國最重要的糧食作物之一。 在以稻米為主食的中國北方，水稻更是人們?nèi)粘Ｉ钏匦璧募Z食作物。 實踐證明， 秈粳雜交的后代在生長勢、適應(yīng)性、抗逆性、豐產(chǎn)性比親本具有更大的生物優(yōu)勢。 同時，大量培育優(yōu)良的秈粳雜交后代也是當(dāng)前超高產(chǎn)育種的主要途徑之一， 因此鑒別優(yōu)質(zhì)的秈粳雜交后代對于提高糧食產(chǎn)量具有極其重要的意義。 現(xiàn)在通過形態(tài)學(xué)對水稻的分類雖然簡便易行， 但是僅可簡單的分為秈，偏秈，偏粳，粳稻四種，還不能滿足育種學(xué)家的要求。因此，建立一種高效快速的方法來鑒定水稻雜交后代的秈粳稻特性為篩選優(yōu)質(zhì)雜交品種、加快超高產(chǎn)雜交育種的進程有著極其重要的意義。
本文選擇了15對簡單序列重復(fù)標(biāo)記（Simple Sequence Repeat， 簡稱SSR標(biāo)記），并以典型粳稻和典型秈稻品種為對照， 對沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)稻物耕作實驗室提供的12種秈粳雜交后代進行研究，證明了這12種秈粳雜交品種都具有秈稻特性，同時并篩選出三對可以區(qū)分秈粳亞種之間的差異。
通過實驗證明CTAB法提取DNA在濃度和純度上都優(yōu)于SDS法， 并且CTAB法可以滿足SSR標(biāo)記的分析要求。 在PCR過程中， 從15對引物中篩選出3對引物，分別是RM4，RM240，RM226。 這三個引物能將12種典型秈粳雜交后代的基因組DNA擴增出具有多態(tài)性的條帶。 通過對差異性條帶的分析， 證明SSR分子標(biāo)記法可以用于秈粳雜交品種的秈粳特性分析。

關(guān)鍵詞：簡單序列重復(fù)標(biāo)記（SSR），秈稻（Indica），粳稻（Japonica），PCR


目　　錄

摘要 - 1 -
ABSTRACT - 3 -
前 言 - 4 -
1． 雜種優(yōu)勢理論與雜交水稻 - 4 -
2．用分子標(biāo)記篩選出具有秈稻特性的粳稻品種 - 5 -
3．DNA 分子標(biāo)記 - 6 -
4．微衛(wèi)星標(biāo)記及其特點 - 7 -
5．水稻微衛(wèi)星標(biāo)記的發(fā)展和應(yīng)用 - 7 -
1材料與方法 - 9 -
1.1供試材料和主要儀器 - 9 -
1.1.1供試材料 - 9 -
1.1.2主要儀器 - 11 -
1.1.3引物 - 11 -
1.2實驗方法 - 12 -
1.2.1 水稻幼苗DNA的提取 - 12 -
1.2.2 DNA濃度及純度的確定 - 14 -
1.2.3 PCR分析 - 14 -
2結(jié)果與分析 - 17 -
3 結(jié)論與討論 - 18 -
參考文獻 - 20 -

參考文獻

[1] 余守武， 劉宜柏 .分子標(biāo)記在水稻遺傳育種中的應(yīng)用 . 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2003 ， 25(1)
[2] 楊振玉、高勇等. 水稻秈粳亞種間雜種優(yōu)勢利用的研究進展. 作物學(xué)報. 1996，22（4）：422-429
[3] 曾千春、周開達等. 中國水稻雜種優(yōu)勢利用現(xiàn)狀. 中國水稻科學(xué). 2000，14（4）：243-246
[4] Oka H L. Origin of cultivated rice [M]. Tokyo：Jpn Sci Soc Press， 1988
[5] 樊葉楊，莊杰云等.應(yīng)用微衛(wèi)星標(biāo)記鑒別水稻秈粳亞種. 遺傳. 2000， 22(6):392-394